昆蟲桿狀病毒

桿狀病毒（Baculovirus）被廣泛用于在昆蟲細胞中生產(chǎn)大量重組蛋白，因其具有以下優(yōu)點：（1）適當?shù)姆g后修飾，因為昆蟲細胞是高等真核生物；（2）病毒基因組比較大，約130 kb，因此具有多個基因或大插入片段的高容量；（3）生物安全性高，因為野生桿狀病毒不會感染人類；（4）強啟動子Polyhedrin或p10驅動的蛋白產(chǎn)量非常高。我們開發(fā)出一系列專有技術和試劑，從病毒滴度、純度、活性以及一致性等方面顯著提升了桿狀病毒包裝工藝水平。

訂購信息

生產(chǎn)規(guī)格	總量	最小滴度	分裝	價格（CNY）	周期
昆?桿狀病毒中量制備	>10⁶ PFU	>10⁶ PFU/ml	10x100 ul	￥4,680.00	15-22天
昆?桿狀病毒?量制備	>10⁷ PFU	>10⁷ PFU/ml	10x100 ul	￥7,780.00	22-29天

服務詳情

病毒類型

我們提供的昆蟲桿狀病毒類型為AcMNPV毒株（Autographa californica multicapsid nucleopolyhedrovirus）。

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交付內容

	桿狀病毒病毒制備服務
交付內容	定制病毒，按照規(guī)格交付：中量制備：>10⁶PFU/ml，10x100 ul ?量制備：>10⁷PFU/ml，10x100 ul
交付內容	對照病毒，按照定制病毒的規(guī)格對應贈送：中量制備：>10⁶PFU/ml，2x100 ul ?量制備：>10⁶PFU/ml，2x100 ul
病毒重懸液	HBSS緩沖液
運輸/存儲	干冰/-80°C，避免反復凍融
推薦應用	昆蟲細胞轉導

對照病毒

為了更好地開展您的實驗，我們按照“對照病毒與定制病毒的生物學應用相匹配”的原則給您贈送或者推薦對照病毒。例如，如果定制病毒表達一個基因，則推薦的對照病毒表達熒光蛋白EGFP。推薦的對照病毒信息如下表所示：

對照病毒	對照載體名稱	對照載體ID	定制病毒
EGFP對照桿狀病毒	pBV-EGFP	VB010000-9305vtu	哺乳動物基因表達桿狀病毒

運輸/儲存

我們的桿狀病毒存儲在DPBS緩沖液中，并采用干冰運輸。收到病毒后，立即放置于-80℃，長期貯存至少6個月。桿狀病毒放置于-20℃可保存一周。請避免反復凍融，因為這會導致病毒滴度大幅下降。

生產(chǎn)/質控

步驟	描述	時間
Transformation into E. coli cells	將攜帶目的基因（Gene of Interest，簡稱GOI）和Tn7轉座位點的轉移載體（Transfer vector）轉化到特定大腸桿菌里，此菌株含有一個表達Tn7轉座酶的輔助質粒（helper plasmid）和一個含有桿狀病毒基因組序列的大質粒（即bacmid，約136 kb，在桿狀病毒序列中有Tn7轉座位點）。在該細菌里，轉移載體上的目的基因轉座到bacmid上，形成攜帶目的基因的重組bacmid。	第1天
Transfection into insect cells	重組bacmid經(jīng)過檢測且序列無誤后，將重組bacmid質粒DNA轉染昆蟲Sf9細胞。此時包裝出來的為粗制的桿狀病毒。	第4天
Virus amplification	病毒擴增：使用粗制的桿狀病毒再次感染包裝細胞，從而擴大病毒產(chǎn)量。	第9天
Virus purification	從培養(yǎng)上清中收集病毒顆粒。對于大規(guī)格包裝，采用蔗糖離心進一步濃縮。	第14天
Quality Control	我們采用基于qPCR的方法測定昆蟲桿狀病毒的滴度。對于每一個我們生產(chǎn)的桿狀病毒，質量控制均包括滴度測定（Titer determination）、微生物（細菌和真菌）檢測（Bioburden test）、支原體檢測（Mycoplasma test）。若轉移載體同時編碼一個熒光蛋白，我們還會將病毒進行細胞轉導以測定相應的熒光表達情況（Transduction test）。	第15天及以后