云舟生物的過表達穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株可幫您克服基因瞬時轉(zhuǎn)染效率的不穩(wěn)定性。我們的基因過表達細胞采用慢病毒轉(zhuǎn)導以及抗性篩選方法制備。目的基因表達水平采用RT-qPCR方法驗證。此外,我們還會對每批細胞株產(chǎn)品進行一系列QC檢驗,如無菌檢測、支原體檢測等。根據(jù)您的需求,我們還可提供其它檢測方項目,如WB、免疫組化試驗等。
亮點:
- 轉(zhuǎn)基因永久整合:慢病毒轉(zhuǎn)導的轉(zhuǎn)基因整合宿主細胞基因組,細胞傳代多次后仍具有穩(wěn)定的表達效果。
- 可轉(zhuǎn)導多種靶細胞:基因轉(zhuǎn)導采用的慢病毒的包膜蛋白為VSV-G,具備感染多種類型的哺乳動物細胞的能力。
- 周期短:載體設計完成后的細胞從改造到交付,快至9周。
服務詳情
圖1 基因過表達穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株的構(gòu)建流程。
訂購信息
服務 | 交付內(nèi)容 | 價格(CNY) | 周期 |
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基因過表達細胞穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建 | 多克隆細胞群(>106個細胞/管, 2管) | ¥13,980起 | 8-11周 |
兩個單克隆細胞株(>106個細胞/管, 每個克隆各2管) | ¥18,980起 | 13-16周 |
* 增加交付克隆數(shù)將收取額外費用。
QC試驗
試驗項目 | 方法 |
基因過表達驗證(默認) | RT-qPCR |
表達測試(額外收費) | WB、IF、FACS |
無菌測試(默認) | 支原體檢測、生物負荷檢測等 |
下游服務
對于您的細胞穩(wěn)轉(zhuǎn)株,我們可以開展多種類型的表型分析和功能驗證,包括細胞增殖、凋亡、遷移、細胞活力、細胞毒性等。
案例分析
圖2 基因過表達細胞穩(wěn)轉(zhuǎn)株的表達驗證。(A)在ID8、CHO-K1、HEK293細胞中分別過表達慢病毒轉(zhuǎn)導的MSLN、B7-H3、以及CD19,流式細胞術(shù)分析。(B)WB分析Caco-2細胞的蛋白表達水平。(C)熒光素酶試驗檢測MCF7細胞中過表達的熒光素酶報告基因。(D)表達熒光素酶報告基因的Renca細胞源性異種移植小鼠模型,體內(nèi)成像追蹤腫瘤遷移。
常見問題解答
| 方法 | 優(yōu)勢 | 不足 |
基因過表達 | 慢病毒 | 技術(shù)簡單 | 隨機插入 |
基因敲入 | CRISPR(RNP電轉(zhuǎn)) | 靶向整合 | 需要轉(zhuǎn)導多種組分 |
| 優(yōu)勢 | 不足 |
慢病毒轉(zhuǎn)導 | 轉(zhuǎn)基因整合宿主細胞基因組、轉(zhuǎn)基因永久表達、較容易轉(zhuǎn)導靶細胞轉(zhuǎn)導 | 低裝載量(最高6.7 kb) |
質(zhì)粒轉(zhuǎn)染 | 裝載量上限高(可達27 kb) | 瞬時表達、傳代后質(zhì)粒濃度降低、需要電轉(zhuǎn)或其它轉(zhuǎn)染方式 |
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