文庫設計

設計一個優(yōu)化后的文庫對于篩選實驗的成功至關重要。我們的技術團隊可以為您設計具有高效且無差錯克隆特點的文庫載體，其中可包含各種合適的篩選標記或barcode序列，并且可產(chǎn)出具有高信噪比特征的穩(wěn)定結果。根據(jù)您的研究需求，您可以選擇我們的各種經(jīng)過驗證的基因遞送系統(tǒng)，比如慢病毒、AAV、轉座子、常規(guī)質粒和腺病毒。

對于CRISPR和RNAi功能篩選，如果您需要幫助針對您的基因組靶基因設計gRNA或shRNA序列，我們可以基于我們強大的計算機資源和優(yōu)化流程為您設計。對于雙載體系統(tǒng)的CRISPR文庫，我們還可以根據(jù)您的篩選策略，設計和構建相應的Cas9或Cas9變體表達載體。

預制質粒DNA文庫的擴增

為獲得插入目的載體骨架的DNA變異體，我們可以使用從頭合成、定向進化或以上方法的組合。變異體最少通過一輪PCR擴增并同時以高覆蓋率克隆到目的載體骨架中。將文庫質粒DNA轉化大腸桿菌進行擴增培養(yǎng)后，取對數(shù)生長期的菌液制備成甘油菌進行保存。為了評估文庫的覆蓋率和均一性，在病毒包裝之前對文庫質粒進行NGS分析。

文庫病毒包裝

您可能需要通過病毒（如慢病毒或腺相關病毒）將文庫轉到細胞中。我們研發(fā)出了一系列專利技術和試劑，大大改進了病毒包裝的滴度、純度、活性和均一性等。我們可為您的篩選實驗在短周期內提供提供預制的病毒文庫。

功能篩選樣品的NGS測序分析

功能篩選后，您可以直接將基因組DNA樣品寄送給云舟生物，我們將為您制備NGS文庫、高通量測序和數(shù)據(jù)分析，并在短短幾周內告知您樣品的精確讀取計數(shù)（read counts）。