無(wú)細(xì)胞蛋白合成系統(tǒng)

云舟生物的無(wú)細(xì)胞蛋白質(zhì)合成 (CFPS) 平臺(tái)可提供高質(zhì)量的重組蛋白生產(chǎn)服務(wù)。CFPS可在體外試管中進(jìn)行蛋白質(zhì)表達(dá)。通過(guò)CFPS進(jìn)行重組蛋白質(zhì)表達(dá)的過(guò)程經(jīng)過(guò)優(yōu)化和改進(jìn)，最短可在五天內(nèi)完成，是一種高效的蛋白質(zhì)合成方法。

亮點(diǎn)

周期短
高水平控制反應(yīng)條件
適用于在細(xì)胞系統(tǒng)中難以表達(dá)的抗體片段的生產(chǎn)
適用于目的蛋白的高通量生產(chǎn)

服務(wù)詳情

Cell-Free_Protein_Expression_Service

無(wú)細(xì)胞蛋白合成系統(tǒng)的工作流程從表達(dá)載體的設(shè)計(jì)和構(gòu)建開(kāi)始，該載體將用作CFPS中的模板。裂解大腸桿菌細(xì)胞，收集粗提取物。含有必要細(xì)胞器的裂解液將進(jìn)一步處理，并補(bǔ)充必要的組分，如能量分子、氨基酸和DNA或mRNA模板，然后啟動(dòng)體外轉(zhuǎn)錄和翻譯過(guò)程以進(jìn)行蛋白質(zhì)合成。從體外翻譯合成蛋白質(zhì)到蛋白質(zhì)純化以及QC的過(guò)程最快可在1天內(nèi)完成。

運(yùn)輸與存儲(chǔ)

我們的載體默認(rèn)以E. coli甘油菌形式交付。根據(jù)需求，我們也可以交付質(zhì)粒DNA，并收取一定的額外費(fèi)用。我們大部分重組蛋白以凍結(jié)的液體形式交付，并以干冰形式運(yùn)輸。接收到重組蛋白后，請(qǐng)將其存儲(chǔ)于-20°C到-80°C的無(wú)菌容器。存儲(chǔ)妥當(dāng)?shù)闹亟M蛋白通?？煞€(wěn)定保存一年。同時(shí)，我們建議對(duì)接收到的重組蛋白進(jìn)行分裝以避免反復(fù)凍融。

質(zhì)量控制

云舟生物克隆的所有載體都保證100%的序列準(zhǔn)確性。云舟生物生產(chǎn)的所有重組蛋白均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)量控制（QC）。對(duì)于大多數(shù)系統(tǒng)，默認(rèn)的質(zhì)量控制包括：（1）酶切分析和Sanger測(cè)序驗(yàn)證蛋白質(zhì)表達(dá)載體；（2）通過(guò)A260/280測(cè)量和SDS-PAGE確定蛋白質(zhì)的濃度和純度。下表列出了常見(jiàn)的額外QC項(xiàng)目服務(wù)。這些服務(wù)可根據(jù)具體需求提供。

額外QC項(xiàng)目	方法
內(nèi)毒素檢測(cè)	LAL
蛋白鑒定	Western Blot
	Intact MS (reduced)
	SEC-HPLC
	SEC-MALs
	蛋白N端測(cè)序
	宿主蛋白檢測(cè)
標(biāo)簽去除	蛋白酶消化n
動(dòng)力學(xué)和親和性分析	Octet
動(dòng)力學(xué)和親和性分析	Biacore
針對(duì)嚙齒類動(dòng)物的病原體檢測(cè)

技術(shù)詳情

案例研究

High-throughput VHH synthesis by CFPS. scFv synthesis by CFPS. The purity was determined to be >90% by SDS-PAGE.

圖1 （A）利用無(wú)細(xì)胞蛋白合成系統(tǒng)高通量生產(chǎn)的VHH。SDS-PAGE結(jié)果展示了重組蛋白的分子量，純度≥90%。（B）利用無(wú)細(xì)胞系統(tǒng)合成的scFv。SDS-PAGE結(jié)果展示了重組蛋白的分子量，純度≥90%。