作為慢病毒基因遞送領(lǐng)域的杰出專家，云舟生物推出的LentiBuilder™慢病毒包裝試劑盒可讓您直接在自己的實驗室輕松制備高質(zhì)量的第三代慢病毒。該試劑盒采用我們專有的miniVec®技術(shù)開發(fā)，對包裝系統(tǒng)進行了全面優(yōu)化，確保包裝出的慢病毒具有卓越的病毒滴度和轉(zhuǎn)導(dǎo)效果。
亮點
超高滴度可包裝獲得超高滴度（107–108 TU/ml）的常規(guī)慢病毒，同時也能可靠產(chǎn)出超大基因組的慢病毒。
使用簡易將高效的包裝系統(tǒng)簡化為兩管試劑：一管是將包裝質(zhì)粒以最佳比例混合的預(yù)混液，另一管是高效的細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑。
高兼容性將試劑盒與通過云舟生物設(shè)計的轉(zhuǎn)移質(zhì)粒載體結(jié)合使用時，可為您帶來最佳的病毒包裝體驗。
訂購信息
| 產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 用量 | 數(shù)量 | 價格 | 現(xiàn)在購買 |
|---|
| LentiBuilder™慢病毒包裝試劑盒 | LVKT0010 | 10次反應(yīng) | | {[ qty1 * 2880 | areaCurrency:0]} | |
| LVKT0050 | 50次反應(yīng) | | {[ qty2 * 9980 | areaCurrency:0]} | |
產(chǎn)品組分
| 貨號 | 組分 | 規(guī)格 |
|---|
| LVKT0010 | LentiBuilder™慢病毒包裝預(yù)混液 | 1 x 80 ul |
| LentiBuilder™細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑 | 1 x 500 ul |
| LVKT0050 | LentiBuilder™慢病毒包裝預(yù)混液 | 5 x 80 ul |
| LentiBuilder™細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑 | 5 x 500 ul |
運輸和存儲
LentiBuilder™慢病毒包裝試劑盒以常溫方式運輸。收到該產(chǎn)品時，慢病毒包裝預(yù)混液應(yīng)存儲于-20℃；細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑應(yīng)存儲于4℃并避免反復(fù)凍融。該試劑盒以恰當(dāng)條件儲存時，其保質(zhì)期約為一年。
注意：LentiBuilder™慢病毒包裝試劑盒僅限于科研用途。該試劑盒通過云舟生物的專有技術(shù)開發(fā)，未經(jīng)云舟生物事先同意，使用者不得轉(zhuǎn)售或復(fù)制該試劑盒內(nèi)的任何內(nèi)容。
技術(shù)詳情
慢病毒是最常用的可實現(xiàn)高效基因遞送的病毒載體。慢病毒可將目的基因（GOI）永久整合至宿主細(xì)胞基因組，支持各種類型的體外、體內(nèi)及離體應(yīng)用，包括文庫篩選、細(xì)胞穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建、基于CRISPR技術(shù)的基因組編輯以及表達CAR分子等。一次成功制備第三代慢病毒的包裝實驗需要將轉(zhuǎn)移質(zhì)粒（攜帶GOI）和包裝質(zhì)粒（編碼Gag/Pol、Rev以及VSV-G等包膜蛋白）共轉(zhuǎn)染至包裝細(xì)胞（比如293T細(xì)胞）。
圖1 使用LentiBuilder™慢病毒包裝試劑盒生產(chǎn)慢病毒的流程
我們通過深度優(yōu)化慢病毒包裝系統(tǒng)，開發(fā)出LentiBuilder™慢病毒包裝試劑盒，可讓您在自己的實驗室包裝獲得的慢病毒達到與云舟生物生產(chǎn)的慢病毒相當(dāng)?shù)馁|(zhì)量。該試劑盒包含兩個組分：配比與濃度經(jīng)過優(yōu)化的包裝質(zhì)粒預(yù)混液，以及用于高效轉(zhuǎn)染包裝細(xì)胞的轉(zhuǎn)染試劑。所有包裝質(zhì)粒均采用云舟生物miniVec®技術(shù)構(gòu)建，可進一步提升所生產(chǎn)慢病毒的滴度、安全性、活性及批次一致性。
- 病毒滴度
- 細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)
圖2 使用LentiBuilder™慢病毒包裝試劑盒獲得的慢病毒有著領(lǐng)先市場的功能滴度。我們對不同的慢病毒包裝系統(tǒng)進行了測試對比，實驗使用了攜帶不同類型的轉(zhuǎn)基因以及病毒基因組大小各異的轉(zhuǎn)移載體。所有系統(tǒng)均使用等量轉(zhuǎn)移質(zhì)粒，并按照各系統(tǒng)推薦的包裝質(zhì)粒用量和比例進行配置。實驗最終采用qPCR測定293T細(xì)胞中的病毒功能滴度。實驗結(jié)果表明，LentiBuilder™在所有載體類型中的表現(xiàn)均超越了其主要的競爭對手，即使對于基因組超大（>9.2 kb）的慢病毒也能高效進行包裝并獲得很高的滴度。
圖3 使用LentiBuilder™包裝系統(tǒng)生產(chǎn)的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)難轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞類型。該數(shù)據(jù)來源于云舟生物客戶并已取得可公開許可。
（A）使用攜帶EGFP報告基因的shRNA表達慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)小鼠原代海馬神經(jīng)元細(xì)胞。轉(zhuǎn)導(dǎo)后第5天拍攝細(xì)胞圖像（MOI=7）。
（B）使用攜帶EGFP報告基因的基因過表達慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)原代人造血干細(xì)胞。轉(zhuǎn)導(dǎo)后第8天拍攝細(xì)胞圖像（MOI=50）。
兩組實驗中：曝光時間=100 ms；放大倍數(shù)=100×。
文檔
使用說明書COAMSDS常見問題解答
不論是選擇試劑盒還是病毒包裝服務(wù)均可以獲得高質(zhì)量且轉(zhuǎn)導(dǎo)效率領(lǐng)先同行的慢病毒。下表總結(jié)了二者產(chǎn)品服務(wù)的不同之處：
| LentiBuilder™慢病毒包裝試劑盒 | 慢病毒包裝服務(wù) |
|---|
| 使用門檻 | 慢病毒包裝實驗要求相關(guān)的實驗操作知識、實驗設(shè)備以及BSL-2環(huán)境 | 無門檻，完全交由云舟生物的技術(shù)團隊負(fù)責(zé) |
| 病毒類型 | VSV-G假型化的第三代慢病毒 | - 三代慢病毒
- 二代慢病毒
- 非整合型慢病毒（IDLV）
- 不同類型包膜蛋白（VSV-G、GaLV、RD114等）假型化的慢病毒
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| 相關(guān)技術(shù) | - 包裝質(zhì)粒：使用基于miniVec®系統(tǒng)的專有技術(shù)開發(fā)
- 轉(zhuǎn)染體系：針對10 cm培養(yǎng)皿的包裝規(guī)格專門優(yōu)化
- 下游純化：試劑盒未提供相關(guān)試劑
| - 包裝質(zhì)粒：與病毒包裝試劑盒相同
- 轉(zhuǎn)染體系：根據(jù)不同規(guī)格進行優(yōu)化
- 下游純化方式：PEG濃縮；對于超純化等級的慢病毒，可采用蔗糖密度梯度離心；無菌過濾
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| 典型滴度 | 107–108 TU/ml | 108–1010 TU/ml |
| 質(zhì)量控制（QC） | 使用者可根據(jù)研究需要、個人能力以及設(shè)備情況選擇適合的QC試驗 | 全面的QC試驗，通常包括滴度測定、轉(zhuǎn)導(dǎo)測試、無菌測試等項目，并提供qPCR、流式細(xì)胞術(shù)測定、內(nèi)毒素測定等額外選項，以達到進一步的質(zhì)量保證 |
| 時間要求 | 可根據(jù)個人需求靈活操作，最快可在3天時間完成病毒包裝 | 包含QC服務(wù)可快至6天交付，高效且可靠 |
| 推薦應(yīng)用 | 細(xì)胞試驗（對于更為精細(xì)的應(yīng)用，推薦進行額外的純化） | 細(xì)胞試驗或體內(nèi)應(yīng)用 |
我們的試劑盒專門為包裝VSV-G慢病毒而設(shè)計。如若需要包裝使用其它包膜蛋白的慢病毒，比如使用 GaLV、RD114、BaEV或者冠狀病毒刺突蛋白，請查看我們的慢病毒包裝服務(wù)。
| 慢病毒 | MMLV | 腺病毒 | AAV |
| 組織嗜性 | 廣泛 | 廣泛 | hAd5只感染表達CAR受體的細(xì)胞 | 取決于血清型 |
| 是否可感染非分裂細(xì)胞 | 是 | 否 | 是 | 是 |
| 病毒基因組穩(wěn)定整合抑或游離于宿主基因組 | 穩(wěn)定整合 | 穩(wěn)定整合 | 游離的DNA附加體形式 | 游離的DNA附加體形式 |
| 最高滴度 | 高 | 中等 | 高 | 相當(dāng)高 |
| 自定義啟動子 | 是 | 否 | 是 | 是 |
| 應(yīng)用 | 細(xì)胞培養(yǎng)和體內(nèi)實驗 | 細(xì)胞培養(yǎng)和體內(nèi)實驗 | 體內(nèi)實驗 | 體內(nèi)實驗 |
| 體內(nèi)免疫反應(yīng) | 低 | 低 | 高 | 非常低 |
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