我們使用的gRNA設(shè)計(jì)和評分使用了 CRISPR文庫設(shè)計(jì)（CLD）中的規(guī)則。簡而言之，對于每個(gè)物種，我們找出符合N₍₂₀₎NGG規(guī)則的靶序列，把錯(cuò)配堿基≤3的序列列為潛在的脫靶位點(diǎn)，計(jì)算出每個(gè)gRNA的脫靶分值，進(jìn)而得出最終的gRNA特異性分值。gRNA特異性分值在0-100之間，分值越大靶向特異性越高。

請注意特異性分值只是一個(gè)參考值。實(shí)際的靶向效率和特異性可能會(huì)與預(yù)測的分值有偏差，低分值的gRNA也可能有較好的靶向效果。