根據(jù)我們的經(jīng)驗(yàn)，如果客戶從VectorBuilder購買病毒載體，但選擇自己包裝病毒，而不是使用我們的病毒包裝服務(wù)，有50%以上的幾率得到的病毒滴度明顯低于最佳水平。這可能會導(dǎo)致彼此之間合作的不愉快。在許多情況下，選擇自己做病毒包裝的客戶往往會指責(zé)我們的病毒載體包裝效果差，滴度低，但當(dāng)他們選擇了我們的病毒包裝服務(wù)后，才知道同樣的載體VectorBuilder可以實(shí)現(xiàn)良好的滴度水平。

VectorBuilder研發(fā)出了一系列專利技術(shù)和試劑，大大改進(jìn)了病毒包裝的滴度、純度、活性和均一性等。當(dāng)客戶自己包裝病毒時，他們通常使用的是未經(jīng)優(yōu)化的操作規(guī)范，同時再加上缺乏經(jīng)驗(yàn)，這些因素都會導(dǎo)致產(chǎn)出的病毒滴度很低。我們經(jīng)常看到客戶犯下低級錯誤，如使用錯誤的包裝細(xì)胞或輔助質(zhì)粒。一些客戶錯誤地使用第二代慢病毒包裝系統(tǒng)來包裝我們的載體（VectorBuilder所有慢病毒載體都屬于第三代病毒包裝系統(tǒng)）。

T排除人員的技術(shù)能力因素，一些病毒載體由于各種原因本身難以被包裝。最常見的原因之一是病毒載體攜帶對包裝細(xì)胞有毒性的基因，使得包裝細(xì)胞被殺死或狀態(tài)非常差。針對這些情況，VectorBuilder已經(jīng)開發(fā)了專利技術(shù)來克服毒性基因的影響，使其仍然可以包裝出病毒。另一個常見的原因是插入片段對于該病毒包裝系統(tǒng)來說太大了。我們建議您將慢病毒載體的插入片段大小限制為6.4 kb，腺病毒載體為7.5 kb，AAV載體為4.2 kb，MMLV載體為5.5 kb。如果插入片段超過上述限制，則會導(dǎo)致病毒包裝效率下降。此外，根據(jù)我們的經(jīng)驗(yàn)，如果病毒載體含有高GC序列（幾百個堿基的GC含量>70％），則會降低其病毒包裝效率。

隨著時間的推移，包裝好的高滴度病毒，其滴度也會降低，尤其是慢病毒。慢病毒非常不穩(wěn)定，如果不在-80℃保存或者反復(fù)凍融可致其快速失去感染性。相比之下，腺病毒和腺相關(guān)病毒更穩(wěn)定，但如果長時間未凍存或者處理不當(dāng)，也可能會喪失感染活性。

有時候，VectorBuilder制備的病毒會給客戶帶來實(shí)際滴度遠(yuǎn)低于所標(biāo)示滴度的錯誤印象，特別是客戶使用那些更難轉(zhuǎn)導(dǎo)的細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)病毒時。另外，客戶通過表達(dá)熒光強(qiáng)度或者藥物篩選標(biāo)記來評估病毒滴度，可能會導(dǎo)致嚴(yán)重低估病毒滴度，因?yàn)闊晒饣蛩幬锖Y選標(biāo)記可能由于沉默或其他原因而無法在一些宿主細(xì)胞中檢測到表達(dá)，或者是一個細(xì)胞可能感染了多個病毒顆粒?；谶@些原因，在進(jìn)行大量轉(zhuǎn)導(dǎo)實(shí)驗(yàn)前，最重要的是先使用病毒對靶細(xì)胞進(jìn)行不同感染復(fù)數(shù)（MOI）的小規(guī)模測試，以便得到轉(zhuǎn)導(dǎo)該細(xì)胞的最佳MOI值。

我們提供慢病毒、MMLV逆轉(zhuǎn)錄病毒、腺病毒和腺相關(guān)病毒等病毒包裝服務(wù)。請您選擇我們的病毒包裝服務(wù)，因?yàn)槲覀儗Ｓ械陌b試劑，包裝細(xì)胞和方案對我們的病毒載體而言都是最優(yōu)的。我們生產(chǎn)的病毒通常會比客戶自己包裝的具有更高的滴度、更高的純度和更強(qiáng)的活性。我們的價格是具有高度競爭性的，可能低于您自己包裝病毒的成本。

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